انواع محیط کشت در آزمایشگاه
20 شهریور 1401 1401-06-19 16:44انواع محیط کشت در آزمایشگاه
انواع محیط کشت در آزمایشگاه
اول از همه باید بگوییم:
محیط کشت چیست؟
محیط های کشت محیط هایی هستند که مواد مغذی و مواد معدنی ضروری را برای حمایت از رشد میکروارگانیسم ها در آزمایشگاه فراهم می کنند.
میکروارگانیسم ها دارای ماهیت، ویژگی ها، زیستگاه و حتی نیازهای تغذیه ای متفاوتی هستند، بنابراین کشت آنها با یک نوع محیط کشت غیرممکن است. با این حال، میکروارگانیسمهایی نیز وجود دارند که در هیچ شرایطی نمیتوانند روی محیطهای کشت رشد کنند – اینها پارازیت ها (انگلهای) اجباری نامیده میشوند.
کشت میکروارگانیسم ها برای تشخیص بیماری های عفونی، به دست آوردن آنتی ژن، توسعه سنجش های سرولوژیکی برای واکسن ها، مطالعات ژنتیکی و شناسایی گونه های میکروبی ضروری است. همچنین برای جداسازی کشت های خالص، ذخیره ذخایر کشت، مطالعه واکنش های بیوشیمیایی، آزمایش آلودگی میکروبی، بررسی عوامل ضد میکروبی و اثرات نگهدارنده، آزمایش تعداد زنده، و تست حساسیت آنتی بیوتیکی ضروری است.
محیط های کشت را می توان به سه روش طبقه بندی کرد: بر اساس ثبات، جزء تغذیه ای و کاربرد.
طبقه بندی محیط های کشت بر اساس ثبات
محیط جامد: در این محیط ها آگار که یک زنجیره بلند و بدون انشعاب از پلی ساکاریدها است با غلظت 1.5-2.0 درصد اضافه می شود. معمولاً از 1.3% آگار برای تهیه محیط جامد در آزمایشگاه استفاده می شود. محیط حاوی آگار در دمای 37 درجه سانتیگراد جامد می شود. نمونه هایی از محیط های جامد عبارتند از: آگار خون(blood agar)، آگار مغذی(nutrient agar)، آگار مک کانکی و آگار شکلاتی.
محیط نیمه جامد: این محیط دارای غلظت 0.2-0.5 درصد آگار است و به دلیل کاهش غلظت آگار، به صورت یک ماده نرم و ژله مانند ظاهر می شود. این عمدتا برای مطالعه تحرک میکروارگانیسم ها، تمایز بین سویه های باکتریایی متحرک و غیر متحرک استفاده می شود. نمونه هایی از محیط های نیمه جامد عبارتند از: محیط تخمیر اکسیداسیون هیو و لیفسون، محیط های استوارت و آمیز و محیط های متحرک مانیتول.
محیط های مایع: این محیط ها حاوی هیچ اثری از مواد جامد کننده مانند آگار یا ژلاتین نیستند و رشد زیادی از کلنی های باکتری در محیط مشاهده می شود. محیطهای مایع را آبگوشت نیز مینامند، هنگامی که در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت انکوبه میشوند، امکان رشد یکنواخت و کدورت سویههای باکتریایی را فراهم میکنند. این رسانه برای رشد فراوان میکروارگانیسم ها و مطالعات تخمیر استفاده می شود. از این نمونه عبارتند از محیط کشت سویا Tryptic، محیط کشت کربوهیدرات قرمز فنل، محیط کشت MR-VP و محیط کشت مواد مغذی.
طبقه بندی بر اساس جزء تغذیه ای
کشت ساده: این یک محیط همه منظوره است که از رشد میکروبهای غیرضروری پشتیبانی میکند و در درجه اول برای جداسازی میکروارگانیسمها استفاده میشود. به عنوان مثال می توان محیط کشت مغذی، پپتون واتر و نوترینت آگار نام برد.
محیط های پیچیده: محیط های حاوی مواد مغذی در مقادیر ناشناخته هستند که برای ایجاد یک ویژگی خاص از یک سویه میکروبی اضافه می شوند. به عنوان مثال می توان به محیط کشت سویا تریپتیک، آگار خون و محیط کشت مواد مغذی اشاره کرد.
محیط های مصنوعی: محیط های مصنوعی نوعی محیط های شیمیایی تعریف شده هستند و از مواد شیمیایی خالص تولید می شوند. رسانه تعریف شده به محیطی اطلاق می شود که غلظت مشخصی از مواد مانند قند (گلوکز یا گلیسرول) و منبع نیتروژن (مانند نمک آمونیوم یا نیترات به عنوان نیتروژن معدنی) داشته باشد. به طور کلی در تحقیقات علمی مورد استفاده قرار می گیرد و نمونه آن Czapek Dox Medium است.
طبقه بندی محیط های کشت بر اساس کاربرد / ترکیب شیمیایی
محیط های پایه: این ها به طور معمول محیط های ساده ای هستند که دارای منابع کربن و نیتروژن هستند که رشد بسیاری از میکروارگانیسم ها را تقویت می کنند. آنها همچنین به عنوان رسانه های همه منظوره شناخته می شوند و رسانه های غیرانتخابی محسوب می شوند.
محیط های پایه برای رشد باکتری های غیر مستعد نیاز به منابع غنی سازی ندارند و برای رشد استافیلوکوک و انتروباکتریاسه مناسب هستند.
آنها معمولاً برای جداسازی میکروارگانیسم ها در آزمایشگاه ها یا در فرآیندهای کشت فرعی استفاده می شوند. به عنوان مثال می توان به محیط کشت مغذی، نوترینت آگار و آب پپتون اشاره کرد.
محیط غنی شده: این محیط با افزودن مواد اضافی مانند خون، سرم یا زرده تخم مرغ در محیط پایه تهیه می شود. برای رشد میکروارگانیسمهای سختگیر استفاده میشود، زیرا به مواد مغذی اضافی و مواد محرک رشد نیاز دارند.
به عنوان مثال می توان به آگار شکلاتی، آگار خون و شیب سرم لوفلر اشاره کرد. از محیط شکلاتی برای رشد N. gonorrhea استفاده می شود در حالی که از بلاد آگار (که با افزودن 5-10 درصد خون حجمی به پایه خون آگار تهیه می شود) برای شناسایی باکتری های همولیتیک استفاده می شود.
محیط های انتخابی: این محیط رشد میکروب های خاصی را امکان پذیر می کند و در عین حال از رشد میکروب های دیگر جلوگیری می کند. این یک محیط مبتنی بر آگار است که برای جداسازی میکروارگانیسم ها در آزمایشگاه استفاده می شود.
منبع https://conductscience.com/culture-media